IDENTIFIKASI MIKROBA METODE PEWARNAAN GRAM
Metode Pewarnaan Gram
Sumber Gambar From Om Gugel
Welcome! Welcome! Welcome back para Typo Hunters, Apa kabar!! tak terasa sudah materi terakhir dalam pembahasan makhluk halus yang tiada bosannya kita membahas nya karena tanpa pembahasan yang lebih dalam kita tak tau karateristik makhluk halus ini. Jangan anggap ini adalah pertemuan terakhir kita, jangan takut. Kedepannya akan lebih banyak lagi materi-materi hebat yang akan kita selidiki lagi. Karena ilmu kita di pertemukan *Eakkk :v. So, Let's Begin.........
PEMBAHASAN
Pewarnaan gram merupakan pewarnaan yang
digunakan untuk mengelompokan bakteri gram positif dan gram negatif.
Lactobacillus
casei merupakan salah satu bakteri yang digunakan
dalam fermentasi susu. Bakteri ini merombak glukosa pada susu menjadi asam
laktat, sel berbentuk batang, gram positif, dan koloninya berwarna putih susu. Produksi
asam laktatnya membuat lingkungannya bersifat asam dan mengganggu pertumbuhan
beberapa bakteri merugikan.
Pewarnaan Gram merupakan salah satu metode untuk
menentukan jenis bakteri termasuk Gram positif atau Gram negative. Hal ini akan
diketahui dari peptidoglikan pada dinding sel. Prinsip pewarnaan gram yaitu
ketika bakteri ditetesi larutan Kristal violet, maka larutan bakteri akan
menunjukkan warna ungu atau mempertahankankan warna dari Kristal violet,
sedangkan bakteri gram negative menunjukkan warna merah dari larutan safranin
atau dengan kata lain warna ungu pada Kristal violet tidak dapat dipertahankan
oleh bakteri gram negative dan akan larut bersama alkohol ketika proses
pemucatan.
Proses
mengidentifikasi mikroba metode pewarnaan gram melewati beberapa tahap antara
lain fiksasi dan penuangan larutan Kristal violet, larutan iodine, larutan
alkohol, larutan safranin, dan larutan akuades. Larutan Kristal violet
berfungsi memberi warna ungu pada bakteri gram positif, iodine berfungsi
memperkuat warna primer pada bakteri gram positif, larutan alkohol berfungsi memucatkan atau melunturkan warna primer pada
bakteri gram negative, larutan safranin berfungsi memberi warna merah pada
bakteri gram negative, dan larutan akuades berfungsi membilas bakteri ketika
sudah ditetesi larutan-larutan diatas.
Lactobacillus casei
Lactobacillus casei adalah bakteri yang digolongkan dalam probiotik termasuk bakteri Gram-positif,
anaerob, tidak memiliki alat gerak, tidak menghasilkan spora, berbentuk batang
dan menjadi salah satu bakteri yang berperan penting. Bakteri ini
berukuran 0,7–1,1 x 2,0–4,0 µm. Lactobacillus casei adalah bakteri yang bisa
memecah protein, karbohidrat, dan lemak dalam makanan, dan membantu penyerapan
elemen penting dan nutrisi seperti mineral, asam amino, dan vitamin yang
dibutuhkan manusia dan hewan untuk bertahan hidup.
BAKTERI GRAM POSITIF DAN NEGATIF
Perbedaan Bakteri Gram Positif dan Negatif
Sumber Gambar From Om Gugel
Bakteri terbagi atas
bakteri Gram positif dan bakteri Gram negative. Bakteri Gram positif dinding
selnya mengandung peptidoglikan dan juga asam teikoat dan asam teikuronat. Oleh
sebab itu dinding sel bakteri Gram positif sebagian adalah polisakarida. Pada
beberapa bakteri asam teikoat merupakan antigen permukaan (antigen dinding
sel), dan ada yang merupakan selaput pada selnya. Pada pewarnaan Gram bakteri Gram
positif berwarna ungu.
Bakteri Gram negatif merupakan bakteri yang
dindinng selnya dapat menyerap warna merah. Bakteri ini memiliki lapisan
peptidogligan yang tipis yang terdapat pada ruang periplasmik yaitu antara
membrane luar dan membran plasma.
METODE PEWARNAAN GRAM
Pewarnaan
Gram dilakukan dengan beberapa metode seperti metode pewarnaan diferensial, pewarnaan sederhana. Metode pewarnaan diferensial
adalah mewarnai sel-sel bakteri hanya digunakan satu macam zat warna saja.
Kebanyakan bakteri mudah bereaksi dengan pewarna-pewarna sederhana karena sitoplasmanya
bersifat basofilik (suka akan basa) sedangkan zat-zat warna yang digunakan
untuk pewarnaan sederhana umumnya bersifat alkalin (komponen kromoforiknya
bermuatan positif). Metode
pewarnaan difensial dibagi atas pewarnaan Gram, dan pewarnaan tahan asam.
Metode pewarnaan Gram adalah suatu
metode untuk membedakan spesies bakteri menjadi dua kelompok besar, yakni Gram positif
dan Gram negatif, berdasarkan sifat kimia dan fisik dinding sel mereka. Sedangkan
metode tahan asam pewarnaan yang ditujukan terhadap bakteri yang mengandung
lemak dalam konsentrasi tinggi sehingga sukar menyerap zat warna, namun jika
bakteri diberi zat warna khusus misalnya karbolfukhsin melalui proses
pemanasan, maka akan menyerap zat warna dan akan tahan diikat tanpa mampu
dilunturkan oleh peluntur yang kuat sekalipun seperti asam-alkohol.
KALIAN TAU APA ITU FIKSASI?
Fiksasi
adalah proses pelekatan dan penempelan struktur sel mikroorganisme pada suatu
posisi. Fiksasi dilakukan setelah pengolesan mikroba pada kaca preparat. Olesan
yang belum kering akan mengakibatkan sel-sel mikroba menjadi tidak beraturan
bentuknya. Fiksasi yang terlalu lama akan menimbulkan kematian sel pada bakteri
sehingga selnya sulit dilihat di mikroskop. Tujuan dari fiksasi adalah agar
mikroba dapat melekat dengan baik dan tidak mudah larut saat proses pembilasan
dengan akuades.
KRISTAL VIOLET
Kristal violet merupakan pewarna primer (utama)
memiliki komposisi Kristal violet 2 gram, Alkohol 95% sebanyak 20 ml,
Aquadest 80 ml, dan Amonium oksalat sebanyak 0,8
gram. Cara pembuatannya dimulai dengan persiapan alat dan bahan. Selanjutnya,
Kristal violet dicampur dengan ammonium oksalat dan dihaluskan dengan stampler
kemudian ditambahkan akuadesdan alkohol. Bahan yang tercampur diaduk rata dan
dimasukkan ke dalam botol.
Pewarna Kristal violet memberi warna ungu pada mikroorganisme
yang diinginkan dan berfungsi membentuk ikatan mg-Ribonucleid acid pada membran
sel bakteri sehingga membentuk kompleks mg-Ribonucleid acid-crystal violet.
Kristal Violet
Sumber Gambar From Om Gugel
SAFRANIN
Safranin
digunakan sebagai pewarna sekunder dalam beberapa pewarnaan preparat dan
memberikan warna merah pada preparat. Komposisi dalam safranin adalah Safranin
sebanyak 0,25 gram, Alkohol 95% sebanyak
10 ml, dan Aquadest sebanyak 90 ml. cara pembuatannya dimulai dengan
penyiapan alat dan bahan. Selanjutnya, semua bahan ditimbang sesuai takaran dan
dicampur lalu dihaluskan dan dimasukkan ke dalam botol.
Safranin
juga memiliki kelemahan diantaranya adalah pada preparat tertentu warnanya
sulit terserap. Zat ini berfungsi untuk mewarnai kembali sel-sel yang telah
kehilangan pewarna utama setelah perlakuan dengan alkohol.
Safranin
Sumber Gambar From Om Gugel
IODIN
Pada proses pewarnaan gram ditambahkan iodine
yang bertujuan agar pengikatan warna oleh bakteri semakin kuat.
Iodine
Sumber Gambar From Om Gugel
ALKOHOL
Alkohol merupakan denaturan protein,
suatu sifat yang terutama memberikan aktivitas antimikrobial pada alkohol. Alkohol mengandung
etanol dan diencerkan hingga konsentrasi 70% menggunakan akuades. Alkohol dalam
proses pewarnaan gram digunakan untuk untuk melunturkan atau memucatkan warna
primer. Hal ini terjadi pada bakteri gram positif yang mengandung banyak lemak
sehingga lapisan dinding selnya larut bersama alkohol danmengakibatkan
lunturnya warna primer.
Alkohol 70%
AQUADES
Akuades digunakan sebagai larutan untuk membilas
mikroba setelah ditetesi larutan Kristal violet, iodine, alkohol,
dan larutan safranin.
Aquades
Sumber Gambar From Om Gugel
HASIL GAMBAR PEWARNAAN GRAM
Hasil kenampakan pewarnaan gram
pada koloni Lactobacillus casei
yang tertutupi safranin.
Sumber Gambar Data Primer
Laboratorium Mikrobiologi
Umum 2017 Unhas
Tolong maafkan bila gambarnya tak sesuai dengan ekspetasi akan tetapi gambar tersebut adalah hasil dari praktikum Identifikasi Mikroba Pewarnaan Gram saya sendiri. Bisa jadi kebanggaan tersendiri karena perjuangan untuk mendapatkan yang maksimal begitu susah dibuat olehnya :v. Mau kalian puji tak apa-apa silahkan bercuit di kolom komentar hehe.
~
Dan selesai sudah, Lukisan maut pebanding gelorak panas dan dingin.
Pasukan penuh dendam berderap, bagai para peziarah menuju makam Sang Pujangga kematian.
Awan dan Api berpesta pora, memuntahkan tarian badai dalam gemuruh genderang perang para pemain sandiwara dari alam baka.
Para pecahan prajurit yang tersisa tersebar, dalam rencana panjang menuntut kebebasan Negeri Harmoni.
Sang Pangeran melangkahkan kakinya menuju pintu keluar, tertahan dalam ironi semanis madu, sehitam arang.
Sang Bocah berdiri sendiri, dalam badai amukan para Pasukan Jiwa-Jiwa Malang.
Sang Badai Datang, Sang Raja Menghadang.
Salam,
Penikmat Ilmu
@indo.onepiece.forum
#indoonepieceforum